【知识干货】洁净环境日常监测划重点了！

随着药品监管力度的加大，市场准入要求的提升，药品生产企业必需严控生产全过程，尤其是无菌药品的生产全过程。根据药品生产质量管理规范附录无菌药品第十条（应当按以下要求对洁净区的悬浮粒子进行动态监测：根据洁净度级别和空气净化系统确认的结果及风险评估，确定取样点的位置并进行日常动态监控）和第十一条规定（应当对微生物进行动态监测，评估无菌生产的微生物状况。监测方法有沉降菌法、定量空气浮游菌采样法和表面取样法（如棉签擦拭法和接触碟法）等。动态取样应当避免对洁净区造成不良影响。成品批记录的审核应当包括环境监测的结果）的规定需对药品的生产环境进行日常监测。日常监测通常包含以下内容： 监测项目、监测计划、监测点位、监测频率、监测数据管理。

监测项目

洁净区的设计必须符合相应的洁净度要求，达到“静态”和“动态”的标准，同时，该区还应当动态监测压差、温湿度、微生物（浮游菌、沉降菌、表面微生物）的情况。微生物主要包括病毒、立克次体、细菌和原生虫类等，但是，与洁净室有关的主要是细菌。因为细菌不能单独生存，所以，它一般都附着在尘粒上，因此，可以通过空调的初效、中效、（亚）高效过滤阻隔尘埃粒子，同时，也能完成对细菌的阻隔。对无菌区来说，微生物检测更重要，但是，直接检测的周期长，所以，可以用粒子水平来间接衡量其具体的情况。也就是说，这两方面的检测可以为无菌生产过程环境的破坏度和卫生状况作评估，为最终产品的放行提供数据支持。

监测计划

一个良好的日常监测计划关键在于结合清洁/消毒周期，确定监测点的位置和适当的监测频率，但没有任何一个取样方案能适用于所有需要监测的环境。

选择取样频率的关键点是能够鉴别出系统潜在的缺陷。取样频率可能需要根据情况做出临时或长久的调整，这些情况包括生产操作、药典要求、微生物趋势变化；添加新设备、附近房间或公用系统的改造等。

每个取样点的监测频率可能会低于系统或洁净区的监测频率（例如，有些取样点是循环测试的）。对于批生产相关的监测频率，可能会不同于常规监测频率。在许多情况下，批生产环境的监测可覆盖洁净区的常规监测。

日常监测过程与验证相比，有所不同的是：日常监测点位可以比验证有所减少，日常监测取样量不必严格依据法规规定，可以适当减少。

监测点位

取样位点的选择很大程度上取决于洁净室的设计和生产过程。在选择取样点时，应对每个程序仔细认真地加以评估。取样的主要目的是提供有价值并可用于判断的数据，以便鉴别/识别特定程序、设备、材料和工艺相关的实际或潜在的污染。取样应设在如果取样点受到污染，则产品很可能受到污染的那些位置，然而，必须谨慎地确定取样点的位置，靠近产品但不要接触产品。

常规监测取样位点应考虑如下因素：

• 在哪些部位的微生物污染，最可能对产品质量造成不良影响？

• 在生产过程中，什么地点最容易长菌？

• 取样点的选择需要统计学设计或根据网格法来确定？ 在常规监测中，有一些点需要周转取样吗？

• 哪些地方是清洁、消毒或灭菌时最难覆盖/接触或最难凑效的部位？

• 什么活动会导致污染的扩散？

• 在某一部位的取样操作，足以导致测试数据的差错或污染产品？取样只应在生产结尾换班时进行吗？

环境动态监测布点的评估方法有多种，下面以冻干工艺为例进行说明（见表1）：

表1 冻干工艺监测点评估

根据上表的评估确定下来的动态风险点位见下图1：

图1 动态风险点位

根据靠近产品但不要接触产品的布点原则，最终确定的动态监测布点图（图2）如下：

图2 最终动态监测布点图

检测频率

在制药行业中，环境监测要求的变化幅度很大，这取决于多种因素，如生产工艺或产品的类型、设施/工艺的设计、人员干预、后续最终灭菌的采用（包括无菌无菌检查及与此不同的参数放行）、环境监测历史数据情况等，但并不局限于所提到的因素。没有一个万能的取样方案能适用于所有需要监测的环境。另外，取样频率可能需要根据情况做出临时还长久的调整，这些情况包括生产操作、药典要求、微生物趋势变化；添加新设备、附近房间或公用系统的改造等。选择取样频率的关键点是能够鉴别出系统潜在的缺陷。

监测数据管理

警戒和纠偏限度

制药企业应根据相应法规指南和历史数据以制定书面形式的警戒线和纠偏线。

截止值法：所有的测试数据为特定采样点，或一组类似的采样点，被安排在一个直方图中进行警戒和行动水平设定，使用第95和第99百分位值作为警戒和行动线。

正态分布法

数据的平均值和标准偏差被计算和警戒和操作水平被分别设定在平均值加上2和3倍的标准偏差。此方法仅用于高计数并且当数据是正态分布的。

监测数据分析

制药企业需要对监测得到的数据进行分析，其目的在于：分析超出限度的结果，确定纠偏措施；考察现行限度标准的适用性；确定系统的性能是否符合预期的要求。日常监测数据的分析和处理流程如下：

• 决定分析目标（例如取样点警戒/纠偏限度的回顾审查，管理更新）

• 规定需分析的数据

• 利用数据绘图，例如柱状图和折线图，来评价基础数据并确定分布的规律（如有）。也可利用这类数据图来确定离群值（异常值，经偏差调查后可能会舍弃）或数据规律等特性。

• 观察数据的分布并试探寻找最适合总体目标的数学模式。如果数据呈现一个具体的分布模式，则可应用参数的化数学模型。如果数据始终是无规律的分布，那么只能应用无参数模型的方法。

• 无论选择什么样的统计模型，分析方法应与数据一致，并和结果一起记录入数据总结中。

调查、纠偏措施

当监测数据出现漂离基线值的异常情况时，需要进行调查以识别造成环境质量水平出现异常的原因，寻找污染源。根据异常情况的风险等级采取不同的纠偏措施并对纠偏措施进行跟踪回顾检查。